Beobachtungstechniken in der Mikroskopie

Die Hellfeldbeobachtung ist die einfachste Mikroskopietechnik. In diesem System tritt Licht durch die Probe oder wird von dieser reflektiert, ohne dass dies über die von der Probe selbst verursachte hinausgeht.

Das gesamte Licht von der Probe und der Umgebung wird von der Linse gesammelt, um ein Bild vor einem vollständig hellen Hintergrund zu erzeugen. Diese Art der Beobachtung eignet sich am besten für Proben, die gefärbt oder mit natürlichen Pigmenten versehen sind und einen hohen Kontrast aufweisen.

Es ist weit verbreitet in der Pathologie und Pflanzen- und Tierhistologie, für die Beobachtung von feinen Gewebeschnitten erscheint die kontrastierte Probe unter einem hellen Hintergrund. Es ist jedoch nicht zu nützlich für die Beobachtung lebender Zellen.

Die Dunkelfeldbeobachtungstechnik ist eine Kontrasttechnik ohne direktes Licht, bei der nur von der Probe gebeugtes Licht zur Erzeugung des Bildes verwendet wird.

Bei dieser Technik müssen die Proben transparent sein und dürfen keine Flecken aufweisen. Das Probenlicht sollte so gesteuert werden, dass das zentrale Licht blockiert ist. Die Beleuchtung (dank des Kondensators) bildet einen hohlen Kegel mit nur schrägem Licht, der die Probe und die Umgebung reflektiert. Das Bild wird mit Lichtstrahlen erzeugt, die von der Probe und dem Tisch gestreut werden und vom Ziel erfasst werden.

Es ist eine geeignete Technik zur Beobachtung lebender Zellen und Organismen. Dies ist so, weil der Kontrast von einem hellen Organismus auf einem dunklen Hintergrund erzeugt wird, so dass wir Hintergründe, Kanten und Konturen des Organismus offenbaren. Eine der Hauptanwendungen ist die Hämatologie an lebenden Blutzellen.

Die Phasenkontrasttechnik entspricht auch einer Kontrastbeobachtungstechnik, unabhängig von der Redundanz. Dies bedeutet, dass das Ergebnis des Bildes die Frucht des Lichtdurchgangs durch die normalerweise lebende Probe und der daraus resultierenden unterschiedlichen Brechungsindizes ist.

Das Licht einer Halogen-Wolfram-Lampe / -Lampe wird durch eine Sammellinse geleitet und auf spezielle Kondensatorringe fokussiert. Wellenfronten, die durch den Ring verlaufen, beleuchten die Probe und gehen direkt (oder gebeugt) durch die Probe und werden durch die Phasengradienten der Probe verzögert. Das ungerichtete Licht, das von der Linse gebeugt und gesammelt wird, wird durch eine Phasenplatte getrennt und auf die Zwischenebene des Bildes fokussiert, um das endgültige Bild zu erzeugen.

Diese Technik wird zur Beobachtung lebender Zellen oder zur Untersuchung von Materialien mit sehr dünnen Schichten verwendet.

Das Fluoreszenzmikroskop basiert darauf, dass die Objekte mit Strahlen einer bestimmten Wellenlänge beleuchtet werden. Das beobachtete Bild ist das Ergebnis elektromagnetischer Strahlung, die von Molekülen emittiert wird, die die Primärstrahlung absorbiert und Licht mit einer längeren Wellenlänge erneut emittiert haben. Ich meine, sie waren aufgeregt. Um nur die gewünschte Sekundäremission durchzulassen, müssen geeignete Filter unter dem Kondensator und über dem Target platziert werden.

Daher könnten wir diese Beobachtungstechnik als indirekt bestimmen, da die Beobachtung oder das Ergebnis auf der Reaktion bestimmter Moleküle oder Zellen auf eine erste Art von Licht oder Strahlung beruht, die sie absorbiert haben.

Fluoreszenzmikroskopie wird verwendet, um bestimmte Substanzen wie Vitamin A oder Fluorochrom-markierte Substanzen nachzuweisen. Es ermöglicht auch die Bestimmung der Verteilung einer einzelnen Molekülspezies, ihrer Menge und Position innerhalb der Zelle. Es ist eine sehr spezifische und weiterentwickelte Technik, die jedoch in der biomolekularen Analyse weit verbreitet ist.